Fluorescencinė mikroskopija: tyrimo ypatybės
Terminas "mikroskopija" turi graikų šaknis. Vertimas reiškia objektų tyrimą naudojant aukšto tikslumo instrumentus. Neseniai vis labiau populiarėja plienas liuminescencija ir elektroninė mikroskopija.
Rezoliucija
Pagal jį, kaip taisyklė, suprantu minimalųAtstumas, kuriuo gali būti skirtingi objektai. Įrangos skyra lems įsiskverbimo į mikroskopinį pasaulį laipsnį, galimybę išnagrinėti tiriamo elemento dydį. Su dideliu objektų ribų padidėjimu gali sujungti. Atitinkamai yra tam tikrų ribų, kurių neviršydama elementų derinimas yra beprasmis.
Liuminescencinės mikroskopijos metodas: mechanizmas
Energijos transformacija, kuri sugeriamedžiaga į matomą spinduliuotę yra švytėjimas. Tai vadinama liuminescencija. Šis reiškinys yra susijęs su tuo, kad kai kurios šviesos įtakos medžiagos pradeda skleisti spindulius su kitu (paprastai didelio) bangos ilgiu. Be to, kai kurie objektai, kurie tam tikros spalvos esant įprastam apšvietimui, veikiant ultravioletiniams spinduliams, keičia spalvą.
Ypatybė
Objektas, kurio negalima matyti ultravioletinėje šviesoješviesa, gali spinduliuoti ryškią spindesį, jei ji yra apdorota specialia medžiaga. Jame elementai šviečia tamsoje skirtingomis spalvomis. Spinduliavimo galia yra kitokia, bet, kaip taisyklė, ji yra maža. Šiuo atžvilgiu fluorescencijos mikroskopija yra efektyvi tamsioje patalpoje. Naudodamiesi tokio pobūdžio tyrimais, objektas žiūrimas šviesoje, kurią jis pats išmeta. Audinių, ląstelių cheminė sudėtis turės įtakos tyrimo kokybei. Luminescencinė mikroskopija tam tikru mastu yra histocheminis tyrimas.
Klasifikacija
Fluorescencinė mikroskopija gali būti pirminis arba antrinis. Pastaruoju atveju objektas yra apdorojamas specialiais junginiais, kurie suteikia švytėjimą. Pagrindinis fluorescencinė mikroskopija yra pagrįstas tiriamojo elemento esminiu gebėjimu skleisti šviesą.
Įranga
Luminescencijos mikroskopija atliekama sunaudojant įvairius įrenginius. Šviestuvas yra pagrindinis jų elementas. Jame yra ultravioletinė lempa. Be to, prietaisai naudoja filtrų rinkinį. Kai kuriuose įrenginiuose yra daug skirtingų konfigūracijų. Priklausomai nuo spalvos yra naudojamas liuminescencine sužadinimo - Ultravioletinės arba mėlyna, tarp šviesos šaltinio ir pagal tyrimo objektą dedamas tinkamą filtrą. Nuo liuminescencijos mikroskopinių elementų energetiškai silpnesnės žadinimo šviesos, ji bus sužvejojamos tik su viena sąlyga. Perteklius spindulių tęsiasi nuo šaltinio turi būti išnaikintas geltona-žalia filtrą. Jis dedamas ant prietaiso okuliaro. Labiausiai ryškus poveikis liuminescencija įvyksta, kai filtras yra visiškai nupjauti šviesos Išeinančios spindulius iš šaltinio.
Ką diegti sudaro matoma spinduliuotė? Jame yra ryškus šviesos šaltinis ir biologinis mikroskopas. Tarp prietaiso veidrodžio ir lempos yra įmontuotas mėlynos violetinės spalvos filtras. Tai gali būti FS-1, UFS-3 ir tt Geltonas filtras įkišamas į mikroskopo okuliarą. Su jų pagalba ant objekto patenka mėlynos-violetinės šviesos. Jis taip pat sužadina liuminescenciją. Tačiau ši šviesa gali trukdyti matyti švytėjimą. Todėl, kelyje į akį, jis nukirsta geltonu filtru. Apšvietimas nustatomas pagal Kohlerio metodą, išskyrus vieną išimtį. Kondensatoriaus diafragma turi būti visiškai atidaryta. Tyrime svarbu naudoti nefluorescencinį panardinamąjį aliejų. Norint sumažinti savo emisiją, į jį įpilama nitrobenzeno (2-10 lašų / 1 g).
Liuminescencinė mikroskopija: taikymas mikrobiologijoje
Šio tipo tyrimo privalumai:
- Galimybė gauti spalvotus vaizdus.
- Aukšto kontrasto lygis savyje spinduliuotiems elementams juodame fone.
- Atskirų rūšių virusų ir mikrobų lokalizacijos nustatymas ir aptikimas.
- Galimybė studijuoti skaidrius ir nepermatomus gyvus organizmus.
- Gyvenimo procesų studija jų dinamikoje.
Taip pat reikia pasakyti, kad liuminescencinė mikroskopija prisideda prie geriausių histologinių ir citochi- mininių metodų kūrimo, greitos diagnostikos.